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無血清培養(yǎng)基更換后細(xì)胞大量死亡的原因探究
發(fā)布時間： 2022-02-14 點(diǎn)擊次數(shù)： 1635次無血清培養(yǎng)基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求，但對有些實(shí)驗(yàn)卻不適合，如觀察一種生長因子對某種細(xì)胞的作用，這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子；又如需要測定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分泌某種物質(zhì)（抗體、生長因子）的能力；或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞，以獲得它們的分泌產(chǎn)物。因此研制出無血清培養(yǎng)基一直是生物科學(xué)工作者努力的目標(biāo)。科研實(shí)驗(yàn)使用轉(zhuǎn)染細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前要換上無血清培養(yǎng)基。本來?xiàng)l件好好的，轉(zhuǎn)染效率也可以接受。但是過了一段時間就發(fā)生了細(xì)胞在有血清的培養(yǎng)基中長的好好的，一換無血清的培養(yǎng)基就死亡的現(xiàn)象。大概4個小時就能看到較多的細(xì)胞飄起來。換了不同批次的培養(yǎng)基，但仍不行，這是怎么回事呢？解析：1.兩周后的培養(yǎng)液應(yīng)補(bǔ)加谷氨酰胺，或者重新配液，轉(zhuǎn)染時應(yīng)不含抗生素。2.確認(rèn)操作方法和環(huán)境，建議檢查一下。3.脂質(zhì)體的毒性很大，如果有質(zhì)粒參與對細(xì)胞損傷更大，如果在常溫放置過，對細(xì)胞更大，假期冰箱是否斷過電。4.培養(yǎng)箱的溫度、CO2濃度，濕度等。
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