-
染料排斥法測(cè)定細(xì)胞生存力實(shí)驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間： 2022-12-13 點(diǎn)擊次數(shù)： 1911次原理
萘黑、臺(tái)盼藍(lán)以及很多其他染料[KahenbachetaL1958]均不能透過(guò)活細(xì)胞。
將細(xì)胞懸液與染料混勻，在低倍顯微鏡下檢査。材料與儀器
胰蛋白酶
巴斯德吸管 顯微鏡 手執(zhí)計(jì)數(shù)器 生存力染料 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板步驟
材料
無(wú)菌
受試細(xì)胞，如胰蛋白酶消化的貼壁細(xì)胞、融化冷凍的細(xì)胞或原代離散的細(xì)胞
合適的生長(zhǎng)液 20ml
0.25% 胰蛋白酶 5ml
D-PBSA10ml
非滅菌
血細(xì)胞計(jì)數(shù)板
生存力染料 1ml (如用D-PBSA 或HBSS 配制的 0.4% 臺(tái)盼藍(lán)或 1% 萘黑）
巴斯德吸管
顯微鏡
手執(zhí)計(jì)數(shù)器
操作步驟
1. 用胰蛋白酶消化或離心與重懸，制備高濃度的細(xì)胞懸液（約1X106 個(gè)/ml)。
2. 取一塊干凈的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，將蓋玻片間定在適當(dāng)位置上。
3 . 將一滴細(xì)胞懸液和一滴（臺(tái)盼藍(lán)）或四滴（萘黑）染料混勻。
4 . 加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中。
5 . 靜置1～2min (但不要放置很久，否則活細(xì)胞會(huì)受到損傷而吸收染料）。
6 . 將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下，選擇10X 物鏡，利用網(wǎng)格線聚焦。
7 . 計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)以及著色細(xì)胞數(shù)。
8 .清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，放人盒內(nèi)。以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測(cè)
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類(lèi)-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測(cè)系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
-
類(lèi)器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫(kù)
-
蛋白研究系列
-
修飾檢測(cè)試劑盒
