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倒置顯微鏡的使用

發(fā)布時(shí)間： 2022-12-05　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1387次

原理
將培養(yǎng)物放在顯微鏡的載物臺(tái)上，打開(kāi)電源，選擇合適的鏡頭，聚焦于標(biāo)本。如果必要的話，將聚光器和相差環(huán)調(diào)節(jié)在中心。
材料與儀器
倒置顯微鏡擦鏡紙
步驟
確保顯微鏡（配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環(huán)）潔凈（用 70 % 乙醇擦拭載物臺(tái)。如果有必要，用擦鏡紙清潔物鏡）。

2. 打開(kāi)電源，將燈光強(qiáng)度從最-低開(kāi)始調(diào)至合適的強(qiáng)度，而不是直接打到強(qiáng)光。

3. 檢查光源與聚光器的銜接：

(a)將一張染色切片、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放在載物臺(tái)上；

(b)關(guān)閉視場(chǎng)光圈；

(c)聚焦在可變光闌上；

(d)將可變光闌成像調(diào)整到視野的中央。

4. 將相差環(huán)調(diào)至中央：

(a)如果顯微鏡配有相差望遠(yuǎn)鏡，將之插入標(biāo)準(zhǔn)目鏡位置，然后聚焦于相差環(huán)，檢査聚光器環(huán)（黑色背景中的白環(huán)）是否與物鏡環(huán)（白色背景中的黑環(huán)）同軸；

(b)如果沒(méi)有相差望遠(yuǎn)鏡，則將染色的標(biāo)本換為沒(méi)有染色的培養(yǎng)物（活的或固定的培養(yǎng)物），重新聚焦，調(diào)整相差環(huán)，直到獲得最-優(yōu)對(duì)比。

5. 觀察細(xì)胞。10× 相差物鏡作為常規(guī)觀察已足夠，4× 相差物鏡不能提供足夠的細(xì)節(jié)資料，而高于 10× 的放大倍數(shù)則限制了觀察區(qū)域。

(a)注意生長(zhǎng)期（例如，稀疏、亞匯合、匯合、致密）；

(b)注意細(xì)胞狀態(tài)（例如，清亮、透明或有顆粒、有空泡等）。

6. 檢査培養(yǎng)基的清亮程度（例如，無(wú)碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等），根據(jù)需要選擇一個(gè)放大倍數(shù)更高的物鏡。

7. 記錄觀察的結(jié)果。

8. 旋低變阻器（把燈光調(diào)暗），關(guān)掉電源。

9. 將培養(yǎng)液放回孵箱，或放在超凈臺(tái)上進(jìn)行無(wú)菌操作。

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倒置顯微鏡的使用

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