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懸浮細胞傳代怎么傳代，看這里！
發(fā)布時間： 2021-09-26 點擊次數(shù)： 3836次小伙伴們都知道，實驗室里培養(yǎng)的動物細胞一般可以簡單地分為兩大類，貼壁細胞和懸浮細胞。貼壁細胞（adherent cells）指的是這類生長必須有可以貼附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長，繁殖的細胞。當(dāng)細胞在該表面生長后，一般會形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細胞或者上皮樣細胞。而另一類則是細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，這類細胞我們稱之為懸浮細胞。懸浮細胞在顯微鏡下觀察，一般是單個生長的大小均一的圓圓的，亮亮的形態(tài)規(guī)則的細胞形態(tài)，也有部分細胞聚集，成團生長。
實際上貼壁生長的細胞跟懸浮的細胞都有很多種?；铙w體內(nèi)的細胞當(dāng)離體置于體外培養(yǎng)時大多數(shù)均以貼壁方式生長，主要包括一些正常細胞和腫瘤細胞，比如成纖維細胞，骨骼組織（骨及軟骨），心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細胞，內(nèi)分泌細胞，黑色素細胞以及各種腫瘤細胞等。
而少數(shù)細胞在體外培養(yǎng)時則是懸浮生長，包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細胞，尤其是血液白細胞以及淋巴細胞等。今天我們就來討論討論懸浮細胞的培養(yǎng)吧。
從懸浮細胞的定義上來說，懸浮細胞是不貼壁的，懸浮生長的細胞，所以由此可知懸浮細胞不需要酶的作用就可以使其從培養(yǎng)容器表面脫離，故懸浮細胞傳代培養(yǎng)的方法較為簡單。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法（在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下）來處理懸浮細胞。當(dāng)小伙伴們觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至 80%～90%（細胞懸液變黃）的時候，細胞就可以進行傳代操作了。
從顯微鏡下觀察，如果細胞狀態(tài)良好（基本無細胞碎片，細胞形態(tài)規(guī)則）時，則可以選擇直接傳代法。將原瓶中的培養(yǎng)基按比例（具體比例視實驗而定，但是不能太稀，太稀細胞長不起來）分裝到新的培養(yǎng)瓶中，然后補加新鮮培養(yǎng)基（補加的培養(yǎng)基量不能太打，否則會導(dǎo)致細胞因為密度過低而養(yǎng)不起來），然后隔天觀察細胞密度來考慮是否需要補液。
但是當(dāng)從顯微鏡下觀察，細胞狀態(tài)較差時（細胞碎片較多，細胞形態(tài)不規(guī)則）時，則需要使用離心傳代法。首先，要將細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，1000rpm 離心 5 min；然后棄去上層清液，輕輕地將細胞沉淀彈散（盡量不用吹打，會導(dǎo)致細胞狀態(tài)不好甚至死亡），使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞；最后用吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養(yǎng)瓶，再加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。
好啦，懸浮細胞的傳代培養(yǎng)就介紹到這里了，小伙伴們下期再見。
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